بررسی اثر نانوذره اکسیدروی(zno) بررشد و بیان ژن همولیزین آلفااستافیلوکوکوس اورئوس

مقدمه و هدف: استافیلوکوکوس اورئوس، بویژه سویه های مقاوم به متی سیلین(mrsa) یکی از مهمترین پاتوژنها در حوزه سلامت و درمان می باشد. امروزه نانوذرهzno بعنوان یکی از مواد اکسید فلزی غیرآلی است که فعالیت ضد باکتریایی فوق العاده ای از خود نشان داده است.این مطالعه به منظور بررسی اثر نانوذره اکسیدروی(zno) بر رشد و بیان ژن همولیزین آلفا استافیلوکوکوس اورئوس انجام شده است. مواد و روشها: تعداد 85 ایزوله استافیلوکوکوس اورئوس از دو منبع مختلف (بیماران و حاملین سالم) مورد بررسی قرار گرفتند. برای تعیین mic تمامی ایزوله ها از روش آگاردایلوشن درغلظتهای µg/ml5000 -2500-1250-625-5/312-156 نانوذرهzno استفاده گردید بعد از تعیین mic، mic50 ، mic90، تغییر در ایجاد همولیز در محیط آگار خوندار واجد و فاقد نانوذره برای بررسی اثر فنوتیپی استفاده شد. در روش ژنوتیپی، بیان ژن همولیزین آلفا در حضور دوز sub-mic و عدم حضور نانوذره با روشreal time pcr بررسی شد. برای انجام real time pcrاز پرایمرهای اختصاصی forward‚reverse ژن hla (ژن همولیزین آلفا)و همچنین ازپرایمرهای اختصاصی reverse،forward ژن dna gyrase subunit b (gyrb) بعنوان کنترل داخلی استفاده گردید. جهت آنالیز و بررسی نتایج از نرم افزارهای2009 chi square,anova,rest استفاده شد و در تمامی موارد p<0.05 معنی دار در نظر گرفته شد. یافته ها:. حداقل غلظت نانوذره که از رشد ایزوله ها ممانعت کرده µg/ml 625 بود.همچنین sub-mic=312/5 µg/ml و mic90=2500‚ mic50=1250 بدست آمد در حالیکه میانگین micنانوذره znoدر ایزوله های جدا شده از حاملین بیشتراز بیماران بود و از نظر آماری. نیز معنی دار بود(p<0.001)، ولی میانگین micنانوذره znoدر سایر متغیرها ارتباط آماری معنی داری مشاهده نشد. در حضور دوز sub-micنانو ذره در روش فنوتیپی همولیز کاملا مهار شد. میزان بیان ژن hla درمحیط نانوذره دار(غلظت sub-mic) نسبت به محیط فاقدنانوذره پس ازانجام real time pcr برابر 29/0 بودکه 4 برابرکاهش یافته بود. نتیجه گیری: نانوذره اکسیدروی می تواند رشد استافیلوکوکوس اورئوس را مهار کرده و دوز sub-mic آن می تواند تولید همولیز در محیط آگار خون دار را متوقف نماید. بخشی از این توقف به علت کاهش شدید در نسخه برداری از ژن همولیزین آلفا می باشد. انجام مطالعات وسیعتر برای شناسائی اثر این نانو ذره بر روی سایر ژنهای ویرولان استافیلوکوکوس اورئوس پیشنهاد می گردد. کلیدواژه ها: استافیلوکوکوس اورئوس، نانوذره اکسیدروی((zno، همولیزین آلفا، بیان ژن، اثر ضدباکتریایی.